ELISA試驗時留意以下幾個方面

ELISA試驗時留意以下幾個方面ELISA試劑盒操作較冗繁,在操作中應留心以下5個方面。1. 跟著病況的開展或由其他要素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標本進行預處理。直接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反應。2. 洗刷是操作進程中抉擇試驗成敗的一個關鍵進程。目的是除去未聯(lián)絡的免疫反應物，中止抗原抗體反應，除去標本中與反應無關的成分、游離的酶標物以及反應進程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)?？捎孟窗鍣C洗板或手工洗板，前者洗刷質(zhì)量較好，各反應孔洗刷效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應留心操控各孔洗刷效果，差異不宜太大。3. 準確判定效果須運用ELISA試劑盒測讀儀，比色法判讀可選擇單波長或長，根據(jù)反應液顏色的不一樣選用不一樣波長的濾光片，以空白孔校零測定反應孔的吸光度值。酶標儀具有出色的重復性。4. ELISA試劑盒加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶聯(lián)絡物、加底物和加中止液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免穿插污染。加酶聯(lián)絡物、底物和中止液時則不需更換吸嘴。5. 在成批手工查看中，還應留心操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應和酶促反應時間不一致，對競爭法及定量查看影響很大，不留心可能會致使過錯效果或定量禁絕。ELISA試劑盒測定進程：固相包被→加待測樣品→溫育→洗刷+加酶標物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加中止液→比色→判定效果。